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来源:http://www.51pxban.com  时间:22-09-30 05:26
摘要: 对于悬浮细胞:离心收集细胞,以2×106细胞为例,在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液,震荡混匀细胞,4℃或冰上裂解30min。以2百万细胞为例,在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓

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两步移植法移植两个胚胎成双胞胎的概率还是比较低的,只有在女性子宫环境好,并且胚胎鲜胚质量好的情况下,才会成功。如果移植一个胚胎,患者的身体情况不好,会导致移植成功率不高,移植两个胚胎是为了保证至少有一个胚胎存活,所以移植两个胚胎成双胞胎的情况是不多的,并且妊娠双胎的风险也比较高。

试管婴儿移植胚胎成双胞胎的案例还是有的,只是妊娠双胎的风险很高,妊娠期间也会有很多并发症,如果胎儿情况不好或者是孕妇身体不理想,医生也会建议减胎,下面可以了解一下移植两个胚胎成双胞胎的概率:

1.一般情况下,生殖中心会做单胚胎移植,只移植一个胚胎,则发生双胞胎的几率就较低;

2.如果如果移殖2-3个胚胎,发生双胞胎甚至三胞胎的几率较高,部分双胞胎的几率只有3%-8%,有的会到30%-40%;

3.两步移植法移植两个胚胎会比单胎的几率高,但移植两个胚胎到女性体内,发生多胎妊娠的发生几率要明显高于自然妊娠,根据数据显示试管婴儿双胎妊娠的几率大概30%左右。


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对于稀释倍数比较大的检测样本,参考稀释方案如下:

稀释100倍:一步稀释。取5μL样本到495μL标准品/样本稀释液内,做100倍稀释;

稀释1000倍:两步稀释。取5μL样本到95μL标准品/样本稀释液内,做20倍稀释,再取5μL 20倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释1000倍;

稀释100000倍:三步稀释。取5μL样本到195μL标准品/样本稀释液内,做40倍稀释,再取5μL 40倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内,做50倍稀释,最后取5μL 2000倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内,做50倍稀释,总共稀释100000倍;

每步稀释时取液量不少于3μL,稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀,避免起泡。


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若所检样本不在说明书所列样本之中,建议做预实验验证其检测有效性。

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若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液,由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。

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某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。

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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本,经BCA法测定样本蛋白含量后,建议进行蛋白浓度的统一化,避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差;例如,统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL,进行后续的稀释和检测。


来源:广东卫生在线

2000年,为解除孩子出生后会得血友病的“魔咒”,钟女士尝试做了国内首例“第三代”试管婴儿。在中山大学附属第一医院(下称“中山一院”)生殖医学中心的专家团队帮助下,她如愿获得了一名健康宝宝。

如今20年过去了,千禧年宝宝已经长大,她的近况如何?近日,中山一院生殖医学中心区护长邓明芬到广东河源回访这个家庭,得知孩子健康长大,目前在读大学二年级,整个医疗团队为此感到欣喜。

借“第三代”试管技术,“终结”血友病遗传

回忆求子往事,钟女士内心仍会隐隐作痛。

她和先生于1992年结婚,婚后第二年即生育一名可爱的男宝宝。后来孩子因血友病去世了,夫妻俩悲痛欲绝。

钟女士是血友病基因携带者,根据遗传规律,如果生男孩50%会得血友病,如果生女孩,50%会是携带者,50%是零携带致病基因者。

1998年,钟女士再次怀孕,产检发现将来生出的宝宝也是血友病患者,她只能忍痛终止妊娠。

1999年,听说中山一院生殖医学中心的“第三代”试管婴儿技术,有望帮她解“魔咒”,遂于当年8月前来求医。

当时中山一院生殖医学中心专家团队为钟女士取得7枚卵子,并采用基于荧光原位杂交(FISH)技术的胚胎植入前遗传学检测技术(PGT),筛选出健康胚胎再放入钟女士的子宫。

中途也还是有波折,钟女士第一次移植胚胎失败了,第二次才成功。2000年4月23日,她如愿得到了一名女宝宝,重7斤。

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今年7月13日,媒体一同连线采访了钟女士,了解孩子近况。钟女士说,孩子这么多年来成长得很顺利,和其他孩子没有区别,记忆力很不错但不太爱运动。

“第三代”试管婴儿≠“定制婴儿”

从中山一院生殖中心诞生我国首例“第三代”试管婴儿以来,至今已经有3105个这种试管婴儿出生了。

有人认为“第三代”试管婴儿就是“定制婴儿”,对此,中山一院副院长、妇产科学科带头人周灿权教授作了解释。

他说,

“第三代”试管婴儿技术的学名是“胚胎植入前遗传学检测技术”,主要是帮助判断胚胎是否存在遗传性疾病基因及染色体数目、结构异常的问题。

它能避免生下地中海贫血、肌营养不良等遗传病儿。

周灿权介绍,如果父母携带有高发生率、高致命性的迟发疾病的相关基因,生出的宝宝患病风险很高,通过该项技术筛选出健康胚胎植入,可避免携带高致命性疾病基因的宝宝出生。“以上这种情况是我们可以接受的,

这跟定制不同肤色眼睛、发色等等的宝宝是不同概念的

。”

“第三代”试管婴儿技术也用于可治疗目的的延伸。

2012年6月,中国首例“治疗婴儿”希希(化名)也是在中山一院生殖中心诞生的,她是带着使命而来的。现在希希已经8岁了。

因父母是β-地中海贫血基因的携带者,他们生下大女儿(希希的姐姐)不幸是一名重度β-地中海贫血患儿。姐姐一边接受输血治疗,一边等待骨髓移植配型。妈妈也曾3次怀孕,但都通过产前诊断被确诊腹中胎儿是重度β-地中海贫血,均引产了。

借助“第三代”试管婴儿技术,夫妻俩想争取再生一名健康宝宝,同时也是为了救大女儿。

经过遗传学筛选,周灿权教授团队不仅确保了希希的诞生是健康的,而且还能保证她的HLA配型与患病的姐姐相吻合。这样,她出生后的脐带血才能救姐姐。

得益于“第三代”试管婴儿技术,希希的出生换来了皆大欢喜的团圆大结局。她的出生也标志着“治疗性试管婴儿技术”在中国获得成功,为需要进行造血干细胞移植治疗疾病的患者带来新生希望。

试管能带来多胎妊娠之喜?专家:背后也有哭的家庭

周灿权介绍,日常接触到不少夫妻提出多胎妊娠的想法,甚至在做试管婴儿过程中为追求稍高点的成功率而多放些胚胎。

其实不然,“看着别人推着两个小孩不要光羡慕。大家只看到出来笑的,没看到躲在家里哭的。”周灿权说,

多胎妊娠的宝宝出现围产期问题甚至新生儿死亡的几率是单胎宝宝的7~10倍。

“这是任何一个家庭都难以承受的。”周灿权强调,“我们永远不协助病人盲目追求多胎妊娠,会严格根据个人情况来决定放多少枚胚胎进去”。

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